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厌氧培养箱的注意事项

 发布时间:2022-09-27 点击量:119

1. 仪器尽可能地安装于空气清净、温度变化较小的地方;
2. 开机前应全面熟悉和了解各组成配套仪器、仪表的使用说明,掌握正确使用方法;
3. 培养物放入是在操作室内达到厌氧环境后放入;
4. 如发生故障(停气等原因)操作室内仍可保持10小时厌氧状态(超过10小时则根据需要把培养物取出另作处理);
5. 经常注意气路有无漏气现象;
6. 调换气瓶时,注意要扎紧气管,避免流入含氧气体;
真空泵按要求使用,定期检查加油。

一、操作室厌氧环境形成
1 按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室内放入二个无毒塑料袋。
2 通电源开照明灯,开控温仪,调节所需温度及安全温度。
3 操作室内放入1000g钯粒(封闭)和500g干燥剂,并放入美兰指示剂(封闭)。
4 关紧取样室内外门,并抽真空校验。
5 操作室内次置换(氮气置换):
(1)先用橡皮管插入操作室内进气口,另一头插入塑料袋。
(2)接通氮气进气路,打开氮气控制阀,使二只塑料袋充足氮气,然后扎紧袋口。
(3)把乳胶手套套在观察板法兰圈上并扎紧。
(4)把塑料袋内氮气渐渐地放于操作室内,至全部放出。
6 操作室D二次置换(氮气置换)重复一 次充氮过程,并注意随时用脚踏开关开闭排气。
7 操作室D三次置换(混合气体置换):
(混合气体配比为:N2↑ 85% H2 ↑ 10% CO2↑ 5%)
(1)调换气路打开混合气道通阀门进气,充气时要随时脚踏开关开闭排气。
(2)混合气充满塑料袋后,关掉混合气直通阀(三通阀),使混合气经过流量计输入操作并调整流量计,流量为每分钟10毫升左右。
(3)把塑料袋内混合气渐渐排于操作室内。
(4)通过三次换气后,操作室内气体含氧量已处于微量状态。
8 操作室内打开钯粒除氧剂,接通除氧催化器电源进行催化除氧,一 小时后打开美兰指示剂(美兰安瓶)观察其变色情况,不变色为操作室内达到厌氧环境。
9 开紫外线灭菌灯,室内进行灭菌处理。灭菌时间自定。
二、菌种的置入和培养
1 检查取样室内门并关紧之。
2 打开取样室外门,将菌种放入取样室后即关上外门。
3 取样室充氮置换三次过程:先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后人工打开氮气阀门进气,使指针回复零位后进行下次操作。
4 如选定真空度较低就需要增加置换的次数。
5 取样室内外门开启,关紧要抽低真空度100毫米汞柱(13 Kpa)检验及帮助操作。
6 厌氧培养箱需要长期连续使用的条件:
(1)每天在操作室内打开美兰指示剂观察,正常情况下使用。如不正常就重新换气。
(2)要长期连续输入微量的混合气体,使补进的氢气能和微量的氧结合通过催化吸收,保证了室内厌氧状态,补入混合气流量选定为每分钟10毫升左右。
(3)连续培养运行一 天,更换一 次除氧剂和干燥剂。
7 接种棒灭菌器的应用:
(1)随时用镍铬电热丝使电短路而变赤热以进行杀菌(接种棒)
(2)熔蜡处可直接放上,试管封蜡口旋转熔蜡。
8 操作室里的培养箱内的温度可任意选择和控制。
9 混合气瓶、氮气瓶输出压力调整:调节减压阀,使输出压力为0.1Mpa左右。